中華海峽兩岸牛樟芝產業發展協會/高雄牛樟菇菌商業同業公會全國聯合會
教授 : 賴宏亮
研究生 : 呂美津
校院名稱 : 屏東科技大學
研究對象及範圍 : 牛樟菇 子實體乙醇萃取物誘導HL60細胞凋亡之研究
摘要
牛樟菇 (Antrodia camphorata) 又名樟菇、樟芝,屬擔子菌綱的藥用性真菌類,在台灣民間用於癌症治療,但是尚未有科學研究證實其抗癌作用。本研究提出 牛樟菇 抗癌的生物活性主要作用是誘導腫瘤細胞發生凋亡現象的假說,並由以下的實驗來證實。實驗設計中,以 trypan blue exclusion 、 Liu’s stain 及 TUNEL (TdT-mediated dUTP-biotin nick end labeling) 染色等檢查法,直接利用顯微鏡觀察 牛樟菇 子實體之乙醇萃取物誘導人類白血病前骨髓細胞 (human promeylocytic leukemia cell) 發生細胞凋亡的現象。以 DNA agarose electrophoresis 來分析細胞凋亡後在膠體電泳呈現的 DNA 斷裂現象 (DNA ladder) ,所產生清晰 DNA ladder 的膠體電泳結果證實細胞凋亡所得到 DNA 片段約為 180bp 倍數的特定長度。並以流式細胞儀 (flow cytometry) 經 propidium iodide (PI) 及 Annexin- Ⅴ -FITC 雙重螢光染色後檢測凋亡細胞的比例。
研究結果顯示,以 200 μg/ml 的 牛樟菇 萃取物處理 6 小時後,與對照組比較下,細胞凋亡的比例從少於 5% 增加至 36% ; 牛樟菇 乙醇萃取物處理 24 小時後,單染 PI 以流式細胞儀分析出凋亡細胞的比例從 5% 增加至 42% 。綜合以上的結果證實,以 200 μg/ml 的 牛樟菇 乙醇萃取物處理人類白血病前骨髓細胞,導致 HL60 細胞發生細胞凋亡的現象最為顯著。因此,本研究首度提出 牛樟菇 萃取物,確實可透過誘導人類白血病前骨髓細胞發生凋亡的現象而達到抗癌之作用。